에세이 ABTS
그것은 분광 광도계 측정을 사용하여 시료의 항산화 능력을 결정하는 분석 방법입니다. UV-Vis 분광 광도계를 사용하여, 라디칼 ABTS · +가 포함 된 용액의 흡광도를 측정합니다. ABST (2, 2'-azinobis (3-ethylbenzothiazolin-6-sulfonate)) 형태의 무색 물질 라디칼은 가시 광선 범위의 파장 특성을 흡수하여 착색됩니다. 수소와 전자를 동시에 전달할 수있는 산화 방지제 분자의 ABTS + + 용액에 무색의 형태로 라디칼의 감소가 결정됩니다. 결과적으로 반응 혼합물의 변색이 일어난다. 존재하는 항산화 제의 양에 비례하는이 표백은 특정 파장 (734 nm)에서 특정 시간에 걸친 흡광도의 감소로 측정 될 수있다. 항산화 제 동력은 참조 표준으로 선택된 항산화 제 분자의 알려진 양에 대해 측정 된 흡광도 값은 보통 아스 코르 빈산 또는 트롤 록스 (이 경우 우리는 TEAC Trolox Equivalent Antioxidant Capacity 항산화 활성에 대해 이야기합니다.
ABTS의 사용에 기초한 항산화 제 전력 측정은 간단하고 신속하다는 장점이 있습니다. 또한 광범위한 pH 범위에서 친수성 및 친 유성 산화 방지 물질 측정이 가능합니다. 그러나, 사용 된 급진 (ABTS • +)은 생리적이지 않으며 생물학적 시스템에 존재하지 않으며 관련된 다양한 항산화 물질의 반응 속도론으로 인한 측정의 반복성 문제가 종종 강조된다는 점을 염두에 두어야합니다.
FRAP (산화 방지제를 줄이는 제철소)
FRAP 테스트는 철 이온에 대한 산화 방지제의 환원 능력을 측정합니다. 그것은 철 이온이 Fe3 +에서 Fe2 +로 전달되는 전자 전달에 기초한 방법이다. 특정 pH 조건 (3.6) 및 TPTZ (2, 4, 6- 트리스 (2- 피리 딜) -s- 트리 아진) 하에서, 이들 이온은 상이한 특성, 특히 환원 된 유도체 (Fe2 + -TPTZ)은 분광 광도계로 측정 할 수있는 593 nm에서 최대 흡수를 갖는 청색으로 가정합니다. 따라서 항산화 물질의 감소 용량은 표준 물질 (예 : 아스코르브 산)에 대한 변화와 비교하여 확립 된 파장에서 산화제를 함유 한 용액의 흡광도의 변화로 측정 할 수 있습니다.
FRAP 테스트는 혈장의 환원력을 측정하기 위해 고안되었지만 순수한 화합물과 복잡한 매트릭스의 항산화 능을 시험하기 위해 적용되었습니다. 사실, 이 방법은 수소 전달을 통해 작용하는 산화 방지제의 작용을 완전히 무시하면서 전자 전달에 의한 환원 능력만을 평가할 수 있기 때문에 산화 방지제 역할을하는 티올 및 단백질과 같은 분자의 기여도를 측정 할 수 없습니다 생물학적 유체 (예 : 혈액)의 기본. 이 방법을 사용할 때의 장점은 체외에서 항산화 제 용량을 측정하는 데있어 가장 간단하고 신속하며 비용이 적게 드는 방법 중 하나라는 것입니다.
DPPH 테스트
2, 2-diphenyl-1-picrilhydrazyl (DPPH)는 매우 안정적이며 상업적으로 이용 가능한 질소 라디칼이며 강력한 항산화 능력을 지닌 분자의 존재 하에서 환원 될 때 강렬한 보라색 - 적색을 특징으로합니다. 항산화 제 화합물과의 반응 후 DPPH 용액의 흡광도 변화를 517 nm에서 분광 광도계로 측정함으로써 시험 물질이 수소 이동 또는 전자 이동으로 작용하는지 여부에 관계없이 시험 물질의 환원 능력을 정량화 할 수있다. 그 결과는 일반적으로 IC50, 즉 초기 DPPH 농도를 50 %까지 감소시킬 수있는 항산화 제의 양으로 표현됩니다.
이것은 빠르고 간단하며 저렴한 방법입니다. 이 분석 기술의 한계는 검사중인 분자가 DPPH 라디칼의 동일한 파장 범위에서 흡수하거나 큰 분자가 입체적으로 모여있는 경우에는 분석 결과가 왜곡 될 가능성에 의해 제공됩니다. 그들은 급진파의 반응 부분과 반응하게된다. DPPH가 산화 방지제와 반응하여 퍼 옥실 라디칼보다 1000 배 이상 천천히 반응합니다.
PCL 시험 (광화학 발광)
PCL 테스트는 화학 발광을 방출 할 수있는 화합물로 UV 라디칼에 의해 광 화학적으로 생성 된 특정 라디칼 종 (과산화물 음이온 (O2 -))의 반응을 기반으로합니다. 사용 된 마커는 루미놀 (luminol)입니다.이 분자는 자유 라디칼에 의해 산화되면 특수기구 (Photochem®)를 사용하여 측정 할 수있는 빛을 방출합니다. 배합 혼합물에 항산화 물질이 존재하면 화학 발광 방출을 억제하는 라디칼 종을 비활성화시킵니다. PCL 분석은 매우 신속하고 민감합니다. ACW (Antioxidant Capacity 수용성) 및 ACL (Antioxidant Capacity Lipid soluble)이라는 두 가지 분석 프로토콜을 적용하여 수용성 성분 (플라보노이드, 비타민 E)의 총 항산화 능에 대한 기여도를 동일한 화합물에 대해 측정 할 수 있습니다. 토코페롤, 토코트리에놀, 카로티노이드 등보다 지방산, C, 아미노산 등). 검사중인 제품의 항산화 능은 표준 참조 분자, ACL 프로토콜의 경우 아스 코르 빈산, ACW 프로토콜의 경우 Trolox와 관련된 측정 값과 비교하여 얻어집니다.
